全波段酶标仪采用酶联免疫吸附试验的基本原理

近年来，国内食品安全问题频出，从“瘦肉精事件”到“三氯氰胺事件”、“苏丹红事件”再“塑化剂事件”等等。这些事件的发生使得酶标仪开始走进人们的视野，不少地区的菜场都开始陆续配备此款医疗器械，常用为全波段酶标仪。那么全波段酶标仪采用酶联免疫吸附试验的基本原理是什么呢？

全波段酶标仪采用酶联免疫吸附试验的基本原理如下：

将过量特异抗体（或抗原）事先包被于载体（酶标板）上，通过抗原抗体反应使待侧物质（抗原或抗体）和酶标记物（用HRP-辣根过氧化物酶标记的抗体或抗原）也结合在载体上（固相分离），经洗涤去除游离的酶标记物后，加入底物，已经结合在载体上的标记酶促使底物显色。利用光电比色法，对待测物进行定性判断或定量测定。

此法检验灵敏度可以达到ng/ml水平。临床样本是血清。

包被酶标板：将特异抗原溶液加入酶标板孔内，4℃过夜。然后用洗涤液洗涤3-5次（手洗或洗板机进行洗板），这样溶液中的特异抗原被牢固吸附在酶标板的微孔表面，形成固相抗原，残液及杂质被清洗掉。
加患者样本液（病人血清），样本液中如果含有待测抗体，经过温育反应，则与已包被的抗原产生特异结合，生成包被抗原与待测抗体的复合物，被吸附在酶标板的微孔表面。然后再次进行洗涤，去除残液及干扰物质。

加酶结合物（特异抗原与酶的结合物），经过温育反应，生成包被抗原+待测抗体+酶标抗原的三者复合物，同样被吸附在微孔表面，然后再次洗涤，去除游离的或非特异沾附的酶结合物（洗板）。

加显色液（底物液，国内常用OPD、TMB两种显色底物液,检验波长分别为492nm和450nm），约经过10-20分钟显色反应，被吸附的复合物中的酶与显色底物液生成有色溶液。此时，由于游离或非特异吸附的酶已被清除，所以溶液颜色的深浅，仅决定于已与待测物结合的酶的量，因此能真实反映待测物的浓度。被固化的酶越多，显色越深，说明待测物浓度越大。hjdsngs